推荐酶切条件：
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成分
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体积
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融合蛋白
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0.1mg
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TEV蛋白酶
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20U
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10x TEV buffer
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10μl
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H2O
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补加至100μl
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温度（℃）
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20-37℃
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时间（h）
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12~16
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使用注意事项：
1）TEV 蛋白酶的最佳酶切温度是30℃，在29-34℃范围内均具有较高的酶活性，当温度达到或高于高37℃时，其酶活性会急剧下降。在实际操作过程中，为尽量保留目的蛋白的结构和生物活性，建议在4℃用TEV 蛋白酶切过夜。TEV 蛋白酶在pH6.0-9.0范围内具有活性，而当pH小于或等于5时，会失去酶活性。
2）TEV蛋白酶的活性不会被常见的丝氨酸蛋白酶抑制剂如PMSF、AEBSF、Bestatin、Pepstatin、E-64、TLCK和EDTA所抑制。但靶向半胱氨酸残基的蛋白酶抑制剂如NEM或IAA等，可以显著抑制TEV 蛋白酶的酶活性，因为天然的TEV 蛋白酶含有其维持酶活性所必需的Cys151。
推荐使用条件
储存缓冲液：25 mmol/L Tris-HCl (pH8.0), 150 mmol/L NaCl, 1 mmol/L EDTA, 5 mmol/L DTT, 50%(v/v)甘油。
10×TEV Buffer：500 mmol/L Tris-HCl (pH8.0), 250 mmol/L NaCl, 5 mmol/L EDTA, 10 mmol/L DTT。
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